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隨著世界繼續與COVID-19大流行作鬥爭,最近發現的SARS-CoV-2變體具有更高的傳播性和更大的嚴重性,這使得開發方便的變體追蹤方法變得至關重要。目前,確定的變體包括在英國首次發現的B.1.17(Alpha)變體和在印度首次發現的B.1.617.2(Delta)變體。

廢水監測已經成為一種重要的公共衛生工具,以非侵入性的方式安全有效地跟蹤SARS-CoV-2大流行,提供補充信息,使衛生當局獲得可操作的社區級信息。最近,研究人員通過主動的廢水監測計劃,在新加坡的住宅區檢測到瞭SARS-CoV-2的病毒片段。這一信息,加上監測測試,使新加坡衛生部能夠迅速做出反應,進行隔離,並作為預防措施的一部分進行拭子測試。

然而,由於現有技術的挑戰,通過廢水監測檢測變異體並不常見。用於廢水監測的下一代測序技術既費時又昂貴。由於測序覆蓋率不一致,測試也缺乏檢測稀釋和混合廢水樣本中低變異體豐度所需的靈敏度。

研究人員開發的方法是為解決這些挑戰而獨特定制的,它擴大瞭廢水監測的效用,不僅僅是測試SARS-CoV-2,而是追蹤令人擔憂的SARS-CoV-2變體的傳播。

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SMART AMR的研究科學傢和該論文的第一作者Wei Lin Lee補充說:“這在與SARS-CoV-2變體作鬥爭的國傢尤其重要。污水監測將有助於找出變體在當地社區的真實比例和傳播。我們的方法足夠敏感,可以檢測到通常在廢水樣本中看到的高度稀釋的SARS-CoV-2濃度的變體,甚至對包含多個SARS-CoV-2系的樣本也能產生可靠的結果。”

在南洋理工大學副教授Janelle Thompson和麻省理工學院教授兼SMART AMR首席研究員Eric Alm的領導下,該團隊的研究"Quantitative SARS-CoV-2 Alpha variant B.1.1.7 Tracking in Wastewater by Allele-Specific RT-qPCR"已發表在《環境科學與技術通訊》上。該研究解釋瞭基於等位基因特異性RT-qPCR的創新、開源的分子檢測方法,該方法可檢測和量化B.1.1.7(Alpha)變體。所開發的檢測方法在美國19個社區的廢水樣本中進行瞭測試和驗證,能夠可靠地檢測和量化低水平的B.1.1.7(Alpha)變體,而且交叉反應性低,在混合SARS-CoV-2病毒的背景下,變體比例低至1%。

針對對B.1.1.7(Alpha)變體具有高度預測性的刺突糖蛋白突變,該方法可以使用市面上的RT-qPCR協議實施。與使用專利引物和探針進行廢水監測的市售產品不同,該論文詳細介紹瞭開源方法及其發展,其他組織和研究機構可以免費使用該方法進行SARS-CoV-2及其變種的廢水監測工作。

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新加坡研究團隊的突破目前被Biobot Analytics使用,這是一傢麻省理工學院的初創公司,也是廢水流行病學的全球領導者,總部設在馬薩諸塞州的劍橋,為全美各州和地方提供服務。使用該方法,Biobot Analytics能夠接受和分析廢水樣品的B.1.1.7(Alpha)變體,並計劃隨著方法的發展在其分析中加入更多變體。例如,SMART AMR團隊目前正在開發能夠檢測和量化B.1.617.2(Delta)變體的特定檢測方法,該變體最近被世界衛生組織確定為一個值得關註的變體。

“利用團隊的創新方法,我們已經能夠監測美國當地人口中的B.1.1.7(Alpha)變體--使領導者獲得有關其社區內COVID-19趨勢的信息,並使他們能夠對控制措施做出深思熟慮的建議和改變,”Biobot Analytics首席執行官兼聯合創始人Mariana Matus博士說。

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“這種方法可以迅速適應檢測B.1.1.7以外的新的關註變體,”麻省理工學院的Alm補充說。“我們與Biobot Analytics的合作將我們的研究轉化為新加坡海岸以外的現實世界的影響,並協助檢測COVID-19及其變體,在決策者追蹤感染集群和考慮合適的公共衛生措施時,作為一個早期預警系統和指導。”

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